• 88bifa

  • 申请试用装
    您当前的位置 :首页 > 最新动态 > 技术库
    细胞培养小常识

    1.切记 ,细胞培养基的储存条件是2-8℃。如果细胞培养基不小心被冻,您应该融化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生 ,培养基可以正常使用,如果出现沉淀,只能丢弃这些培养基 。

    2.贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,可能在放置几天后颜色变紫 。这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时 ,碳酸氢钠导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15min,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。

    3.当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下,抗生素不被灭活,可能对于细胞达到毒性水平。

    4.一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时 ,您应该在两到三周内使用它 。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解 。

    5.总之 ,大部分添加物和试剂最多可以冻融3次,如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,将会影响它的性能 。

    6.血清的热灭活在免疫分析时可以灭活补体系统。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时 ,推荐使用热灭活血清。热灭活是以往公认的操作步骤 ,并没有确凿的证据说明这样做是有益的。相反 ,对大部分细胞而言,GIBCO和HyClone都不推荐热灭活血清。因为加热可能使血清中的沉淀增加,使您误以为污染 。

    7.在进行传代培养时,88bifa强烈推荐进行台盼兰活性记数。研究者常常通过一个简单的稀释(1∶4或1∶2)进行传代,不进行活性检测 ,您可能接种比你认为的低得多的浓度的细胞 ,这常常可能导致生长缓慢或培养物根本不生长 。

     

    8.在订购的细胞到达后 ,应立即复苏,如果培养基还没有准备好,可将其放入液氮中 ,尽快复苏。千万不能放置在-20或-80℃的冰箱内。

     

    9.细胞复苏往往是比较容易出问题的步骤。请在订购细胞时就向供应商索取详细的复苏步骤,并仔细阅读。有些供应商就不推荐在复苏时离心,对此类细节 ,应特别留意。

     

    如何避免血清中沉淀物的产生?

     

    1. 解冻血清时 ,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温) ,若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃) ,实验显示非常容易产生沉淀物 。并随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生 。

     

    2. 请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害 ,而影响血清的质量 。

     

    3.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。

     

    4.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30min的原则 ,并且随时摇晃均匀 。温度过高 ,时间过久或摇晃不均匀 ,都会造成沉淀物的增多。


    公司简介 / Company profile
    上海88bifa生物科技有限公司
    Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
           公司主要依托复旦大学、同济大学等上海地区多家著名高校 ,拥有一支富有经验的开发团队,专业从事细胞及细胞...
    联系88bifa / Contact
    电 话 :021-69950217  173-2144-0983
    传 真:021-69950218
    邮 箱:2078251929@qq.com
    邮 编:201800
    地 址:上海市嘉定区翔江公路518号寅尚产业园D座210室
    Copyright © 2018 CHUANQIU Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved. 沪ICP备18030131号-1
  • 申请试用装
  • 021-69950217

    • XML地图