（1）单独冲洗，防止交叉反应造成污染

。

临床上每天检测的病例很多
，所用的抗体种类及项目也多
，如果在加入一抗孵育完后，将它们在一个缸内洗
，这样就会造成交叉污染，影响最后的结果
。正确的做法是单独地进行冲洗，冲洗的PBS为一次性
，保证切片没有相互交叉污染的机会。

（2）温柔冲洗，防止切片的脱落。

冲洗切片，取出切片，将PBS从上轻轻地冲洗，让PBS自上而下流下来
，不要拿起切片将PBS对准切片冲洗

，这样由于冲出的PBS有一定的冲击力，很容易使切片周边引起松动，导致切片的脱落。

（3）冲洗的时间要足够，才能彻底洗去结合的物质。

冲洗切片有人提出用微振荡器振染，振下未结合的各种物，使之不产生背景
，此种做法一是浪费时间
，二是很容易导致切片的脱落。切片的冲洗据实践认为，用一小烧杯柔和地于切片上冲洗，就能彻底冲洗去未结合的物质
，无需附加其它条件
，冲洗好于切片上再注入PBS，持续2分钟左右就完全足够了。

（4）PBS的PH和离子强度的使用和要求。

中性及弱硷性条件（PH7-8）有利于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低离子强度有利于免疫复合物的形成
，而高离子强度则有利于分解。

（5）常用试剂的配制和使用。

在免疫组织化学的染色过程中

，用得最多的试剂就是缓冲液
，因为切片在整个染色中，抗体的加、换、切片的冲洗

，DAB的配制都离不开缓冲液。可见缓冲液在整个染色中都起至关键的作用
，缓冲液的过酸或偏碱

，都将影响染色的结果
。